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技術(shù)文章

Technical articles

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  • 20211-7
    Western blot內(nèi)參蛋白的選用!

    一、WesternBlot實(shí)驗(yàn)為什么要用內(nèi)參?WesternBlot實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行內(nèi)參校正已成為一種慣例。目的蛋白表達(dá)量的相對(duì)多少,前提條件是等量的組織細(xì)胞蛋白上樣,才有比較的基礎(chǔ),特別是表達(dá)量不高時(shí),上樣量的的差別就很有可能影響結(jié)果的分析。因此,在WesternBlot試驗(yàn)中,進(jìn)行內(nèi)參的檢測(cè),有以下兩點(diǎn)作用:1、校正蛋白質(zhì)定量、上樣過程中存在的誤差,實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性;2、使用內(nèi)參可以作為空白對(duì)照,檢測(cè)蛋白轉(zhuǎn)膜情況是否、整個(gè)WesternBlot顯色發(fā)光體系是否正常。二、你的內(nèi)...

  • 202012-31
    ELASA檢測(cè)方法一

    ELASA:用于檢測(cè)未知抗體的間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。2.次日洗滌3次。3.加稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,后一遍用DDW洗滌。4.加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。5.終止反應(yīng):于各...

  • 202012-31
    PAS染色方法

    一、服務(wù)介紹PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學(xué)上,主要用來檢測(cè)組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個(gè)碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色。隨著醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展,糖原染色應(yīng)用的范圍更加廣泛,如用以證明與鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì),心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,糖尿病的診斷和研究,用于某些腫瘤的診斷等。二、實(shí)驗(yàn)原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色。PAS染色一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過...

  • 202012-24
    MTT和CCK8區(qū)別

    MTT增殖曲線,基本上就是基礎(chǔ)的功能實(shí)驗(yàn)了,養(yǎng)過細(xì)胞的你應(yīng)該都會(huì)做。但是,要怎么樣才能省時(shí)省力呢?你也知道,如果用MTT的話,加入10ul的MTT后要等四個(gè)小時(shí),在活細(xì)胞的線粒體中形成甲囋,然后在把培養(yǎng)基吸掉,再加上DMSO溶解,進(jìn)行檢測(cè)。這個(gè)方法是常用的MTT方法,但是會(huì)有三個(gè)問題,*個(gè)是有的甲囋不容易溶解。還有一個(gè)問題就是,由于要讓DMSO充分溶解甲囋,所以會(huì)要混勻,就會(huì)產(chǎn)生泡沫,影響酶標(biāo)儀讀值:第三個(gè)問題,就是在吸去培養(yǎng)基的時(shí)候,容易把甲囋也吸走,導(dǎo)致終讀值不準(zhǔn)。當(dāng)然也...

  • 202012-24
    血清的保存

    血清的保存應(yīng)該注意以下幾點(diǎn):(1)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中需要長(zhǎng)期保存的血清儲(chǔ)存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過1個(gè)月。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,預(yù)留體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽选#?)熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已解凍的血清。生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活。除非,一般不建議作此熱處理,因?yàn)闊崽幚頃?huì)造成血清沉淀物顯著增多,而且還會(huì)影響血清的質(zhì)量。補(bǔ)體...

  • 20209-18
    行為學(xué)-水迷宮

    1.將水迷宮加入適當(dāng)?shù)乃?,水溫控制?5±1℃。2.實(shí)驗(yàn)前把動(dòng)物帶入實(shí)驗(yàn)室中熟悉環(huán)境。3.設(shè)置軟件。4.一階段:(定位航行)將小鼠頭對(duì)著墻壁依次放入四個(gè)象限水迷宮進(jìn)行實(shí)驗(yàn)(所有小鼠需全部做完后換下一象限)。若動(dòng)物在60s內(nèi)登上平臺(tái)區(qū)域,則錄像結(jié)束。若動(dòng)物在60s內(nèi)未登上平臺(tái)區(qū)域,則用木棍指引大鼠游上平臺(tái),并停留30s。每只小鼠每天訓(xùn)練4次,訓(xùn)練天數(shù)為4天。5.每只動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)束后需用干毛巾擦拭,必要時(shí)需要使用電吹風(fēng)吹干。6.二階段(空間探索):待一象限到第四象限全...

  • 20209-18
    行為學(xué)-曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)

    一、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)介紹曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)是利用動(dòng)物對(duì)新開闊環(huán)境的恐懼而主要在周邊區(qū)域活動(dòng),在區(qū)域活動(dòng)較少,但動(dòng)物的探究特性又促使其產(chǎn)生在區(qū)域活動(dòng)的動(dòng)機(jī),也可觀察由此而產(chǎn)生的焦慮心理。藥物可以明顯增加自主的活動(dòng)而減少探究行為,劑量的抗精神病藥物可以減少探究行為而不影響自主活動(dòng)。二、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)原理該實(shí)驗(yàn)(openfieldtest)又稱敞箱實(shí)驗(yàn),是評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在新異環(huán)境中自主行為、探究行為與緊張度的一種方法。以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在新奇環(huán)境之中某些行為的發(fā)生頻率和持續(xù)時(shí)間等,反應(yīng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在陌生環(huán)境中的自主行為...

  • 20208-26
    慢性支氣管炎動(dòng)物模型

    基本原理慢性支氣管炎(chronicbronchitis)是指由感染或非感染因素引起的氣管、支氣管黏膜及其周圍組織的慢性非特異性炎性反應(yīng)。慢性支氣管炎的病理特點(diǎn)是支氣管腺體增生、黏液分泌增多。臨床常以咳嗽、咳痰或伴有喘息反復(fù)發(fā)作,每次持續(xù)3個(gè)月以上,連續(xù)2年以上的慢性過程為特點(diǎn),嚴(yán)重時(shí)可并發(fā)阻塞性肺氣腫,甚至肺源性心臟病。慢性支氣管炎以老年人居多,病程初期一般癥狀比較輕微,發(fā)病季節(jié)以冬季較為多見,至春季天氣轉(zhuǎn)暖后癥狀緩解;晚期-般表現(xiàn)為炎性反應(yīng)較前加重,且癥狀不分季節(jié)、常年存...

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